МЕХАНИЗМЫ СОПРОТИВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕЙ БЛОКАДЕ ИММУННЫХ СВЕРОЧНЫХ ТОЧЕК (11-27)

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 11
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ

МЕХАНИЗМЫ СОПРОТИВЛЕ НИЯ ОПУХОЛЕЙ БЛОКАДЕ ИММУННЫХ СВЕРОЧНЫХ
ТОЧЕК

Вдовиченко Константин Константинович,
к.б.н., доцент*
Гарбуз Людмила Ильинична,
к.б.н., доцент*
Власов Вадим Вячеславович,
к.б.н., доцент*
Насушная Инна Викторовна ,
преподаватель*
Васильчук Анастаси я Валерьевна,
старший преподаватель*
* ПГУ им Т. Г. Шевченко, медицинский факультет,
каф Биологии и физиологии человека,
Приднестровье , г. Тирасполь

MECHANISMS OF TUMORS RESISTANCE TO IMMUN E CHECKPOINT BLOCKAD E

Vdovichenko Konstantin Konstantinovich,
c.b .s., assistant professor *
Garbuz Lyudmila Ilyinichna,
c.b.s., assistant professor *
Vlasov Vadim Vyacheslavovich,
c.b.s., assistant professor *
Nasushnaya Inna Victorovna,
lecturer*
Vasilchuyk Anastasiya Valeriyevna,
senior lecturer*
* Tiraspol State Univers ity of Pridnestrovie named after T. G. Shevchenko,
Faculty of Medicine, Biology & Physiology Chair,
Tiraspol, Pridnestrovie

Аннотация
«Блокада иммунных сверочных точек» (БИСТ) в лечении опухолей – это использование
терапевтических антител, разрушающих отрицательные регуляторные иммунные каскады, и запускающих
противоопухолевый иммунный ответ. Такие антитела были успешно апробир ованы в клинике, однако во
многих случаях опухоли оказывались резистентными к блокаде. У клиницистов до сих пор мало
инструментов, чтобы перед началом лечения определить: ответит или не ответит пациент на такую
терапию. Новейшие научные исс ледования в онко логии могут дать ответ на этот вопрос. В обзоре описаны
молекулярные механизмы резистентности и рассматриваются подходы по преодолению резистентности к
блокаде в иммунных сверочных точках.
Abstract
«Immune checkpoint blockade» in tumors t reatment implies therapeutic antibodies, destroying negative
regulatory pathways and starting up the anti -tumor immune response. Such antibodies have been successfully
tested in the clinic, but in many cases, tumors were resistant to the blockade. Clinicia ns still have a f ew tools before
starting treatment to determine whether the patient will respond or not to such therapy. The latest scientific research
in oncology can give the answer to this question. The review describes molecular mechanisms of resistan ce and
approaches to overcome the latter to the blockade in the immune checkpoints.
Ключевые слова : БИСТ (блокада иммунных сверочных точек), сигнальные каскады в опухолях,
иммунотерапия, регуляторные каскады, адоптивный перенос
Key words : ICB (immune che ckpoint blockade), oncological signaling pathways, regulatory pathways,
adoptive transfer

Опухолевая иммунотерапия – это стратегия
лечения новообразований путём повышения
цитотоксического потенциала иммунной системы
человека, а в особенности опухоль -специ фичных
цитотоксич еских Т -клеток. С реди различных типов
опухолевой иммунотерапии блокада иммунных
сверочных точек получила наибольшее
распространение для лечения ряда опухолей.
Разработаны несколько антител, атакующих
CTLA4 (антиген цитотоксических Т -лимфоц итов),
PD1 и PD -L1. Активация CTLA 4, PD1 и PD -L1
блокирует развитие иммунного ответа, поэтому

12 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
антитела, которые препятствуют активации данных
молекул (т.е. осуществляют блокаду иммунных
сверочных точек), не дают возможности опухоли
блокировать цитотоксический иммунный отве т.
Большое количество антител и малых молекул,
нацеленных на другие возможные иммунные
сверочные точки (такие как LAG3, TIGIT, TIM3,
B7H3, CD39, CD73 и рецепто р к аденозину A2A) и
разрушающих отрицательное регулирование
между опухолевыми и Т -клетками, или
миелоидными и Т -клетками, находится в стадии
клинических и преклинических испытаний.
Пациент и его возраст, пол, HLA -генотип и
генетический полиморфизм, а так же строма
опухоли (иммунная система хозяина и
ассоциированная с опухолью строма), и средовые
фак торы (микробиота кишечника) влияют на
результат БИСТ (блокады иммунных сверочных
точек) [1, с. 5 82; 2, с. 109]. Однако характеристики
опухолевой клетки (факторы , характеризующие
свойства опухоли) – её генетический,
транскрипционный или функциональный профи ль
– являются основными определяющими факторами
ответа опухоли или её резистентности. Значимость
характеристик опухоли отражается в широкой
вариации ответа на Б ИСТ у разных
гистологических типов и в ответе опухолей с
одинаковыми молекулярными и генетически ми
показателями (например, микросателлитной
нестабильностью). От таких внутренних
характеристик опухоли зависит, как факторы,
внешние по отношению к опухоли (им мунная
система хозяина и опухоль -ассоциированная
строма) будут влиять на резистентность к терапи и.
Внутренние механизмы опухолевой
резистентности
Факторы, определяющие индукцию и
поддержание естественного противоопухолевого
Т-клеточного ответа, довольно с ложны.
Характеристики, присущие самим опухолевым
клеткам, такие как спектр мутаций,
функциониров ание интерферонового сигнального
каскада, экспрессия антиген -презентирующих
молекул и сигнальные пути обхода иммунитета –
влияют на подготовку (прайминг), актив ацию и
привлечение Т -клеток к опухоли, а эти Т -клетки
необходимы для иммунного ответа в контекст е
БИСТ. Резистентность к БИСТ может быть
следствием нарушения в любой из перечисленных
ключевых характеристик опухоли, либо возникать
из-за отсутствия противооп ухолевого иммунного
ответа или ослаблением уже запустившегося
противоопухолевого ответа.
Недост аточно сть «антигенности»
опухоли
Опухолевые неоантигены могут служить
эффективными мишенями для противоопухолевого
иммунитета. Была найдена корреляция между
гру зом мутаций и ответом на БИСТ во множестве
злокачественных новообразований [3, с. 124; 4, с.
218 9]. У пациента, давшего ответ на анти -CTLA4
БИСТ, Т -клетки, специфичные к определенным
опухолевы м неоантигенам, находились в
опухолевом микроокружении, и размно жились в
ответ на анти -CTLA4 терапию [5, с. e440]. Рабочие
неоантиген -специфичные Т -клетки
обнар уживаются в опухолевом микроокружении
даже в отсутствие БИСТ. У пациента с
метастазирующей холан гиокарциномой, среди
инфильтрировавших опухоль лимфоцитов была
выявлена популяция CD4 + T-клеток, специфичных
к опухолевому неоантигену. С помощью
полногеномного секвенирования было доказано,
что инфильтрировавшие опухоль лимфоциты
(ИО Л) содержали CD4+ T -хелперные 1 (T(H)1)
клетки, распознававшие мутацию в белке,
взаимо действующем с erbb2 (ERBB2IP),
экспрессируемом опухолью. Адóптивный перенос
(собственные Т -клетк и пациента,
модифиц ированные и размноженные ex vivo и затем
введенные назад пациенту ) опухоль -
инфильтрировавших лимфоцитов ( ОИЛ),
содержавших порядка 25% специф ических к
данной мутации полифункциональных T(H)1
клеток, замедлил у пациента прогрессию опухоли и
дал длительную стабилизацию болезни. При
прогрессировании болезни пациенту обратно ввели
его же клетки, при этом популяция клеток
содержала уже более 95% реа ктивных на мутацию
T(H)1 клеток. У пациента наблюдали регрессию
опухоли. Данные результаты доказ ывают, что CD4 +
T-клетки, отвечающие на мутированный антиген,
можно использовать для лечения метастатического
эпителиального рака [6, с. 641]. Неоантигены
являю тся ключевыми опухолевыми иммуногенами.
Получены убедительные результаты исследований
вакцин, ос нованных на опухолевых неоантигенах
[7, с. 548]. У пациентов с микросателлитной
нестабильностью, вызванной дефектами в
репарации неспаренных оснований, наблюдае тся
повышенный ответ на БИСТ, что ещё раз
подтверждает роль неоантигенов в
противоопухолевом имм унном ответе. И, наоборот,
опухоли со слабой антигенностью менее
чувствительны к БИСТ ( пояснение: даже при
полной свободе Т -клеток против опухоли они мало
что м огут сделать, если опухоль имеет мало
отличительных меток ).
Опухолевый интерферон -γ сигнальный
каскадный путь
Продуктивный Т -клеточный ответ против
опухолевого антигена приводит к экспрессии
интерферона -γ (IFNγ) опухолевым
микроокружением, а это ведёт к а ктивации JAK –
STAT сигнального пути, который индуцирует
экспрессию лиганда к PD1 (PD -L1). Нарушен ие
интерферон -γ сигнального каскада в опухолевой
клетке предотвращает индукцию экспрессии PD -L1
и таким образом делает блокаду PD1 –PD -L1
неэффективной (рис. 1).

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 13
Рис . 1 . Интерфероновый сигнальный каскад в экспрессии PD -L1 .
a – нормальный противоопухо левый иммунный ответ ва жен для эффективной блокады иммунных
сверочных точек . Опухоль -реактивные Т -клетки, распознающие опухолевые антигены, в контексте MHC
I или II, высвобождают интерферон - γ (IFNγ), что приводит к активации JAK – STAT сигнального
каскада . При этом активируе тся танскрипционный фактор IRF1 (interferon regulatory fa ctor 1) , который,
в свою очередь, активирует транскрипцию гена PDL1 , кодирующего лиганд к PD -1, чем вызывается
адаптивная экспрессия данного лиганда (PD - L1) на поверхности опухол евой клетки, а это, в свою
очередь, ослабляет противоопухолевый Т -клеточный о твет. Антитела против PD1 или PD - L1
разрушают петлю такой отрицательной обратной связи и восстанавливают противоопухолевый
иммунитет.
b – сходный сценарий, в котором опухоль -спе цифичные Т -клетки кон тактируют с антигеном в
контексте MHC, что приводит к вы свобождению IFNγ. Однако в данном случае интерфероновый сигнал
не передаётся в ядро опухолевой клетки вследствие повреждения этого каскада (например, из -за потери
функции JAK1 или JAK2) , и адаптивной экспрессии PD - L1 не происходит, из -за чего БИСТ будет
неэффективна.
IFN γR - IFN γ receptor; TCR - T cell receptor.

Давно известно, что нарушение IFNγ -
сигнального каскада – это механизм
резистентности не только к БИСТ, но и более
шир окой резистентности к противоопухолевому
иммунитету. Опухолевые клетки были взяты от
мышей и модифицированы по экспрессии IFNγ -
рецептора (на его доминантно -негативную форму).
Когда эти клетки привили к опухолям мышей, у
которых уже развился противоопухолев ый
иммунитет (вследствие назначения им
соответствующих доз липополисаха рида),
модифицированные клетки показали
резистентность к ранее развившемуся иммунитету
[8, с. 447] . В другой работе спонтанные опухоли,
возникшие у мышей с отсутствующим IFNγ -
рецептором , были реимплантированы
иммунокомпетентным и иммунодефицитным
мышам, данные опухоли росли с одинаковой
кинетикой. Однако, восстановление функции IFNγ -
рецепторов этих опухолей вызывало их подавление
у иммунокомпетентных (но не
иммунодефицитных) мышей, что п одтверждает
критическую роль опухолевого IFNγ -сигнального
каскада в под авлении её иммунитетом [9, с. 7556].
Белки, участвующие в передаче сигнала в
интерфероновом (IFNγ) каскаде, были
идентифицированы с помощью CRISPR -
скрининга, выявляющего гены, наиболее значимые
для появления резистентности к иммунотерапии. В
одном из иссл едований [10, с. 414] были
сконструированы РНК (guide RNA) к 2 368 генам.
Эти РНК вводили в клетки линии мышиной
меланомы (B16), в которых белок Cas9 был
экспрессирован, что необходимо для работы
системы CRISPR/Cas9. Эти опухоли
имплантировали мышам «диког о типа», которым
затем давали анти -PD1 антитела и GVAX (вакцина,
состоящая из облучённых модифицированных
опухолевых клеток, экспрессировавших в
повышенных количествах гранулоцитарно -
ма крофагальный колоние -стимулирующий фактор
(GM -CSF)). А также имплантиро вали мышам с
отсутствующим локусом (в ДНК) α -цепи Т -
клеточного рецептора. Гены, кодирующие белки,
вовлечённые в сигнальный путь от IFNγ -рецептора,
включая Jak1, Stat1, Ifngr1, Ifngr2 и Jak2 ,
экспрессировались в повышенных количествах в
опухолях мышей «дико го типа». Также был
идентифицирован Ptpn2 (Tyrosine -protein
phosphatase non -receptor type 2) – ген, кодирующий
белок, снижающий чувствительность IFNγ -
рецептора (запускающего каскад), то есть

14 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
являющийся посредником в резистентности к анти -
PD1 антителу и GVA X. В параллельном
исследовании, CRISPR -скрининг был выполнен на
линии меланомы человека in vitro ,
кокультивируемой с Т -клетками,
спроектированными для экспрессии специфичного
к опухолев ому антигену Т -клеточного рецептора
(TCR) [11, с. 538] . И вновь, IFNγ -сигнальный каскад
оказался очень активным в резистентных
опухолевых клетках, при этом в них наблюдалась
высокая транскрипционная активность генов JAK1
и STAT1 , а также гена APLNR , кодиру ющего
недавно идентифицированный регулятор
интерфероновой передачи сигн ала, известный как
рецептор апелина (apelin receptor). APLNR
повышает чувствительность опухолевых клеток к
IFNγ за счет взаимодействия с JAK1.
В третьем скрининге, проведённом с помощь ю
системы CRISPR, клетки мышиной меланомы
культивировались в течение 3 дней совместно с
опухоль -специфичными Т -клетками [12, с. 770]. И
вновь в резистентных опухолевых клетках уровень
транскрипции генов, вовлеченных в передачу
сигнала от IFNγ -рецептора, бы л значительно выше
по сравнению с опухолевыми клетками, которые
совмест но культивировались с неспецифическими
Т-клетками; транскрипция Ptpn2 также была
повышенной. В данном исследовании была
использована клеточная линия мышиной меланомы
B16, предварительно обработанная IFNγ для
повышения экспрессии MHC I, что, возможно,
могло исказить результаты в сторону повышения
активности IFNγ -сигнального пути. Вдобавок к
IFNγ -рецепторной сигнализации, обнаружено, что
компоненты хроматинового регулятора PBAF
(форма SWI/ SNF -комплекса ремоделинга
хроматина, содержащая уникальные субъединицы
ARID2, PBRM1 и BRD7) подавляют экспрессию
генов в ответ на IFNγ и таким образом
способствуют резистентности опухолевых клеток к
уничтожению Т -клетками. Генетическое удаление
этих компон ентов из клеток B16 приводило к
повышению противоопухолевой эффективнос ти
анти -PD1 и анти -CTLA4 БИСТ in vivo .
Исследования подтверждают биологическую
значимость мутаций, приводящих к потере
функции в генах JAK1 and JAK2 , наблюдаемых у
пациентов с меланомо й, у которых после успешной
анти -PD1 -терапии возникли рецидивы [13, с. 819 -
820]. В данном случае потеря адаптивной
экспрессии PD -L1 на самих опухолевых клетках
(что снимает необходимость анти -PD1 терапии) не
объясняет приобретённую резистентность к
противо опухолевому иммунитету. Скорее, что
потеря передачи сигнала от IFNγ -рец ептора
позволяет опухоли избежать функций
противоопухолевых эффекторов иммунной
системы. Сходные свойства мутаций в IFNγ -
задействованных генах наблюдались у пациентов,
не давших ответа на анти -CTLA4 БИСТ [14, с. 397].
В отличие от роли IFNγ -рецепторного
сигнального пути в снижении иммуногенности
опухолей, длительная работа этого сигнального
пути в опухолевых клетках может вызывать
резистентность к БИСТ. Это предположение
основано на сво йствах противовирусного
иммунитета: длительная работа интерферонового
сигнального пути типа I пагубно сказывается на
контроле (сдерживании) вируса [15, с. 202]. В
работе [16, с. 1541] было показано, что длительное
воздействие на клетки мышиной меланомы как in
vitro , так и in vivo , приводит к адаптивной
резистентности к БИСТ п о PD -L1 -независимому
механизму путем увеличения (т.е. на клеточной
поверхности их становится больше) других
ингибирующих Т -клетки рецепторов за счёт
эпигенетических и транскриптомных из менений,
относящихся к IFNγ -сигнальному пути, в
частности, к STAT1. До сих пор не до конца ясно,
какая именно из функций IFNγ -сигнального пути
наиболее важна для успешной БИСТ. Одним из
эффектов IFNγ -сигнального пути является
антипролиферативный эффект [17 , с. 563], который
приводит к координированной экспрессии антиген -
проце ссирующего комплекса и поверхностных
молекул MHC I и II, а также синтезу
хемоаттрактантов CXCL9 и CXCL10 (рис. 2а).

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 15
Рис. 2. Механизм возникновения резистентности к БИСТ в опухоли.
a – основанный на CRISPR скрининг выявил критическую роль интерфероновой сигнализации в
опухоли в ответ на БИСТ и основанную на Т -клетках иммунотерапию. В этих исследованиях были
выявлены компоненты интерферон -γ (IFNγ) и интерферон первого типа сигнальных путей, такие как
JAK1, JAK2, STAT1 и IFNγ -рецептор 1 (IFNGR1) и IFNGR2. Эти компоненты играют наиважнейшую роль
в том, будет ли блокада иммунных сверочных точек успешной или нет. Также была определена роль в
ответе на БИСТ менее известных регуляторов, вклю чая апелиновый рецептор (APLNR), регулирующий
чувствительность к IFNγ и интерферону первого типа; тирозин -протеинфосфатаза нерецепторного
типа 2 (tyrosine - protein phosphatase non - receptor type 2, PTPN2), модулирующая чувствительность к
IFNγ; BRD7 и ДНК -связывающие субъединицы ARID2 и PBRM1, являющиеся частью комплекса
ремоделинга хроматина PBAF, вовлечённого в регулирование экспрессии генов -мишеней IFNγ; а также
специфичная к дцРНК аденозиндезаминаза (ADAR1), отрицательно регулирующая уровень дцРНК в
кле тк е. Сигнальные каскады интерферона первого типа и IFNγ сходятся на сайте активации IFNγ – GAS
(регуляторный участок в ДНК) и ведут к активации транскрипционных регуляторов, таких как фактор
регулирования интерферона 1 (IRF1), что и даёт основные результат ы работы данных сигнальных
путей.
b – во многих исследованиях было показано, что независимые от интерферона дефекты в
презентации антигена также ведут к уходу от иммунного ответа и резистентности к БИСТ. Такие
дефекты встречаются в локусе HLA или в β2 -мик ро глобулине – компоненте комплекса MHC I. Другие
дефекты затрагивают аппарат процессинга антигена, а именно его компоненты: мембранные
транспортерные белки TAP1 и TAP2, субъединицы иммунопротеасомы PSMB8, PSMB9, PSMB10; либо же
повреждется регулировка тран скрипции генов MHC I (например, из -за нарушений в цитоплазматическом
белке NLRC 5). Экспрессия MHC первого класса регулируется и на посттранскрипционном уровне. РНК -
связывающий белок MEX3B взаимодействует с транскриптами HLA - A, что приводит к деградации эт их
транскриптов и, соответственно, снижению экспрессии молекул MHC I. Было найдено, что количество
белка MEX3B повышено у пациентов с меланомой, не давших ответа на БИСТ. Повышенная MHC II -
зависимая презентация антигена на опухолевых клетках ассоциирована с улучшенным ответом на БИСТ,
но в случаях резистентности к иммунной блокаде были обнаружены генетические дефекты в генах MHC
II, либо же в гене транскрипционного активатора MHC II – CIITA.

Клетки меланомы человека, имеющие дефекты
в IFNγ -сигнальном пути , не чувст вительны к
антипролиферативному эффекту интерферона, и не
усиливают экспрессию молекул MHC I [18, с.
15440] .
Потеря MHC в опухолевых клетках
Опухолевые клетки способны избегать
уничтожения Т -клетками путём снижения
экспрессии поверхностных компл ексов MHC
(главного комплекса гистосовместимости).
Взаимодействие опухолевых антигенов
происходит в основном по MHC I -зависимому
пути, дефекты в этом пути наблюдаются чаще, чем
при взаимодействии антигена с помощью MHC II.
Тем не менее, предполагают, что э кспрессия MHC
класса II на клетках меланомы может быть
биомаркером ответа на анти -PD1 терапию.
Наиболее важным следствием передачи сигнала от
IFNγ в противоопухолевом иммунитете можно
считать индукцию или усиление ответа на антиген
с помощью MHC I. В данно м процесс е требуется
координированная экспрессия ряда генов, включая
TAP1, TAP2, B2M , а также генов
иммунопротеасомы PSMB8, PSMB9 и PSMB10 (рис.
2b). На поверхности опухолевых клеток,
потерявших способность передавать сигнал от
интерферона, может оказаться мало или не
оказаться вовсе антиген -взаимодействующих

16 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
комплексов MHC класса I (из -за снижения или
прекращения синтеза самих молекул MHC), что
делает возможным уход от иммунного ответа. Так,
в работе [19, с. 1107] было показано, что при
стабильной трансфек ции опухо левых клеток,
дефицитных по IFNγ, геном TAP1 (Antigen peptide
transporter 1) , у мышей «дикого типа» наблюдалось
подавление опухоли, но не у мышей, дефицитных
по Т -клеткам ( Rag2 -/-). Так, для некоторых
дефицитных по MHC I опухолевых клеток
требуетс я их пре дварительная обработка IFNγ для
координированной экспрессии аппарата
процессинга антигена и комплекса « MHC class I -
пептид» [20, с. 265]. Дефекты процессинга антигена
нарушают экспрессию на поверхности клетки MHC
I, даже если в сигнальном ка скаде IF Nγ нет
нарушений.
Резистентны к иммунотерапии опухоли не
только с такими мутациями. Данные мутации могут
являться результатом селективного давления
иммунной системы. Так, например, было сообщено
[21, с. 100], что у пациентов с меланомой,
получавши х иммуно терапию, иногда теряется
экспрессия β2 -микроглобулина (ген B2M; и таким
образом, теряется экспрессия MHC I). В образцах
продольной биопсии от другого пациента с
метастазирующей меланомой был обнаружен
приобретённый дефицит MHC I вследствие потери
функции г ена B2M , при этом данному пациенту
иммунотерапия не проводилась [22, с. 6593].
Недавно проведённый численный подсчёт
количества копий HLA (лейкоцитарный антиген
человека) позволил исследователям установить
степень клональной и субклональной потери
гетерози готности в локусе HLA. Часто
параллельная субклональная и фокальная потеря
гетерозиготности HLA, особенно часто
встречающаяся в метастазах, говорит о
иммунологическом давлении в этих опухолях даже
без применения иммунотерапии [23, с. 1259].
Сходная связь м ежду имм унологическим
давлением и генетическими изменениями антигена
наблюдалась у пациентов с колоректальными
опухолями, имеющими микросателлитную
нестабильность. Такие опухоли высоко
иммуногенны [24, с. 730].
Было сообщено о некоторых случаях
пр иобретен ной рези стентности к БИСТ вследствие
мутаций в генах, кодирующих этапы процессинга
антигена, в частности, мутаций в гене B2M [13, с.
819] . Более того, при потере гетерозиготности в
B2M -локусе наблюдалась меньшая общая
выживаемость в двух независимы х группа х
пациен тов, получавших лечение БИСТ.
Были идентифицированы новые гены,
регулирующие ответ на антиген. Например, при in
vitro скрининге на усиление функции кинома
(совокупности киназ) было выявлено, что ген
MEX3B , кодирующий посттранскрипционный
негативны й регуля тор HLA -A, позволяет клеткам
меланомы избегать опухоль -специфичных Т -
клеток (рис. 2b ). Примечательно, что наблюдалось
повышение экспрессии MEX3B в группе пациентов,
не давших ответа на анти -PD1 терапию [25. с.
3369].
Регуляция онкогенных си гнальных путей
Онкогенные сигнальные пути вносят важный
вклад в иммунность опухолей на всех стадиях
развития опухоли, включая инициацию опухоли,
рост, инвазию и метастазирование. Остановимся на
нескольких таких каскадах.
WNT –β-катенин сигнальный каскад – это
эвол юционно консервативный путь передачи
сигнала, вовлечённый в широкий круг процессов,
включая онкогенез и эмбриогенез. В каноническом
WNT –β-катенин сигнальном каскаде передача
сигнала начинается со связывания белков из
семейства WNT с рецепторами на клеточно й
поверх ности, активирующимися и передающим
сигнал далее, что приводит к транслокации в ядро
β-катенина и транскрипционной активации генов -
мишеней. Оказалось, что данный сигнальный
каскад является онкогенным, он препятствует
инициации de novo проти воопухол евого
им мунного ответа. Такое заключение появилось на
основании наблюдений, показавших что треть
образцов меланом с активным WNT –β-катенин
сигнальным каскадом имеет недостаточную
инфильтрацию Т -клетками. Клеточные линии
меланомы с активным WNT –β-катенин си гнальным
каскадом синтезируют иммуносупрессирующие
цитокины, такие как IL -10 [26, с. 2110] . Также было
показано, что работа данного сигнального каскада
приводит к предотвращению первичного контакта
коммитированного лимфоцита с антигеном в
противооп ухолевом ответе из-за того, что не
происходит привлечения дендритных клеток,
экспрессирующих BATF3 (basic leucine zipper
transcriptional factor ATF -like 3). В других
исследованиях было показано, что растворимый
WNT -агонист – WNT5A, происходящий из клеток
меланомы, активир ует передачу сигнала от β -
катенина в дендритных клетках, что ведёт к
метаболическому сдвигу: окислительному
фосфорилированию и окислению жирных кислот,
отмеченному активностью индоламин 2,3 -
диоксигеназы 1 (IDO1) и активаторного рецептора
пр олиферац ии перок сисом -γ (peroxisome
proliferator activated receptor -γ, PPARγ), что
приводит к иммуносупрессии. Так, в частности,
конверсия триптофана в кинуренин катализируется
IDO1, а ген этого фермента является
транскрипционной мишенью в инициируемой
WN T5A пере даче сиг нала. Такой метаболический
сдвиг способствует развитию регуляторных (т.е.
ослабляющих иммунный ответ) T -клеток, и в то же
время супрессии активности эффекторных T -
клеток. Ингибирование этого метаболического
сдвига повышает эффективность ант и-PD1
им мунотера пии Braf V600E /Pten -/-мышиной
меланомы [27, с. 147].
В ряде работ по изучению нескольких разных
типов рака была обнаружена связь между
усилением передачи сигнала в WNT –β-катенин
каскаде и отсутствием инфильтрации в опухоль
иммунных клеток. В резул ьтате опухоли х уже

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 17
отвечают на БИСТ (они называются
иммунологически холодными опухолями). Сюда
же можно отнести исследование, интегрирующее
геномные, транскриптомные и
иммуногистохимические данные по образцам
колоректальных опухолей в рамках проекта
Опухол евый Геномный А тлас [24], а также другие
исследования по иммунологически холодным
опухолям яичников, опухолей головы -шеи,
мочевого пузыря и аденоидной кистозной
карциномы [28, с. 927; 29, с. 679; 30, с. 632; 31, с.
563]. В другой работе обна ружили, что уро вень
серин/трео ниновой проеинкиназы PAK4 –
медиатора в передаче сигнала по WNT -каскаду –
повышен в иммунологически холодных опухолях у
пациентов с меланомой, не отвечающей на анти -
PD1 БИСТ. На многих мышиных моделях было
показано, что генети ческое удаление или
фармаколог ическое ингибирование PAK4
приводит к отмене резистентности к анти -PD1
терапии [32] .
CDK4 –CDK6 и клеточный цикл
Доказательства связи между регулировкой
клеточного цикла и онкогенной трансформацией
были получены из наблюдений за вирусной
трансформацией, в едущей к интеграции вируса в
генетический локус циклина А, связыванию
аденовирусного онкогена E1A с циклином А и
повышеннию экспрессиии D -циклинов в
паратиреоидных опухолях [33, с. 1071].
Циклинзависимые киназы CDK4 и CDK6 игр ают
особую роль в онкогенезе, поскольку совместно с
D-циклинами они способствуют прогрессии
клеточного цикла и переходу из фазы G1 в фазу S.
Через десять лет после их открытия Управлением
по контролю за продуктами и лекарствами США
(FDA) был одобрен первый ингибитор CDK4 /CDK6
– пальбоциклиб (palbociclib). Начиная с 2017 года,
по меньшей мере, четыре исследования
подтвердили влияние CDK4/CDK6 -ингибирования
на противоопухолевый иммунитет. Например,
было показано, что CDK4/CDK6 -ингибитор
абемациклиб (abemacicl ib) в комбинаци и с анти -
PD -L1 терапией показал более сильный
противоопухолевый эффект на мышиной модели
опухоли молочной железы, чем агенты по
отдельности. Это наблюдение было связано с
повышением количества двухцепочечной РНК
(дцРНК) и чувствительности к ней в опухолевы х
клетках в рез ультате снижения уровня ДНК -
метилтрансферазы в ответ на лекарство.
Опухолевые клетки распознают сигналы
опасности, такие как дцРНК, благодаря экспрессии
специфических рецепторов. Активация этих
рецепторов усиливает экспрессию
противовоспалит ельных генов, в ключая гены,
кодирующие интерфероны и антигены. В другом
исследовании [34, с. 216] Т-клеток человека в ex
vivo культурах, а также спонтанных и
ксенографтовых мышиных моделей опухолей было
показано, что комбинация пальбоциклиба или
трилацикли ба ( trilaciclib) с анти -PD1 блокадой
оказала более сильный эффект, чем применение
агентов по отдельности. Эффекты ингибирования
CDK4/CDK6 на противоопухолевую иммунность
были связаны с их прямым влиянием на Т -клетки,
что определяло более выс окую выработку ими IL -2
и усил ение инфильтрации в опухоль, несмотря на
снижение их пролиферативной активности.
В работе по изучению транскриптома
единичной клетки из образцов меланомы от
пациентов, получавших лечение БИСТ [35, с. 984],
была выявлена схема (программа , см . да лее)
резистентности с участием CDK4/CDK6. При
сравнении результатов секвенирования тотальных
препаратов РНК в рамках проекта Опухолевый
геномный атлас (группа меланомы), а также
профилей экспрессии опухолей, связанных с
исключением Т -кле ток (т.е. в кот орые не
происхо дило их инфильтрации) было обнаружен
набор генов, экспрессия которых повышалась при
резистентности опухолей к БИСТ. Авторы данного
исследования назвали этот набор генов
программой резистентности . В результате
фармакологическог о скрининга кле точных линий,
экспрессирующих программу резистентности,
было обнаружено, что такие линии чувствительны
к CDK4/CDK6 -ингибиторам. Более того, в ранее
опубликованных данных по изучению влияния
ингибирования CDK4/CDK6 на клетки опухоли
молочной железы в мышины х моделях была
показана репрессия программы резистентности в
ответ на такое ингибирование. CDK4/CDK6
работают через фосфорилирование белка
ретинобластомы 1 (RB1) (онкосупрессора), и таким
образом, ингибирование этих киназ давало
репрессию в двух клеточных линиях меланомы с
нормальным RB1, но не в линии с дефектным RB1.
MAPK сигнальный каскад помогает опухоли
избегать иммунного ответа благодаря повышению
экспрессии иммунорегуляторных (т. е.
ослабляющих иммунный ответ) цитокинов –
интерлейкина 6 и 10 (IL -6, IL-10) [36, с. 1651].
Влияние данного сигнального пути на
иммунологический статус опухоли особенно
сильное для меланом, где примерно половина
опухолей несёт мутации в гене BRAF (участник
передачи сигнала в MAPK -каскаде). В таких
опухолях БИС Т является тера пией первой лин ии.
Вемурафениб (vemurafenib) – ингибитор
мутантного BRAF, повышает восприимчивость
клеток меланомы к цитотоксическому эффекту Т -
клеток, не задевая при этом пролиферативную
активность самих Т -клеток [37, с. 5213]. Такое
повыше ние восприимчив ости можно объя снить
увеличением экспрессии молекул MHC I и
антигенов дифференцировки в меланоме [38, с.
1225]. Вемурафениб также останавливает
прогрессию клеточного цикла путём
кооперативной передачи сигнала через IFNγ -
рецептор и рецептор ф актора некроза опухолей в
прис утствии активирующей мутации BRAF(V600E)
[39, с. 37]. Для подтверждения этого использовали
CRISPR -скрининг опухолевых клеток линии B16,
культивированных совместно с опухоль -
специфичными Т -клетками (как описано ранее).

18 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
При этом оказалось, что в резистентных
опухолевых клетках инактивировались негативные
регуляторы MAPK -каскада. В отдельной работе
секвенировали тотальную РНК, полученную из
образцов опухолей пациентов с меланомой,
которых лечили PD1 -БИСТ. При этом генный
набор от пациентов, кото рые не отвечали на
данную терапию, совмещался с набором,
ассоциированным с резистентностью к MAPK -
ингибиторам [40, с. 35] . Однако эти данные нужно
воспринимать с осторожностью, поскольку они не
подтверждены исследованиями транскриптома
опухо лей от пациенто в с меланомой, леченных
БИСТ [35] . Ингибирование BRAF нарушает
экспрессию иммуносупрессивных факторов в
опухоли. Например, опухоли с мутацией
BRAF(V600E) показали повышение экспрессии
цитокинов IL -6 и IL -10, VEGF (фактор роста
сосудистого эн дотелия), что д ало
иммуносупре ссивный эффект, отчасти из -за их
влияния на функцию дендритных клеток (как и в
случае синтеза IL -12 и фактора некроза опухолей)
[36, с. 1654] .
Разработка комбинированных схем терапии с
использованием БИСТ и ингибиторов мутант ного
BRAF (вему рафениб) пока з астопорилась из -за
угрозы токсичности, поскольку происходит
парадоксальная активация MAPK -пути в клетках с
диким типом BRAF. Поэтому усилия направлены
на использование ингибиторов MEK
(MAPK/extracellular signal -regulated kinas e),
которые бло кируют MAPK -кас кад как в клетках с
мутантным BRAF(V600E) , так и в клетках с BRAF
дикого типа; либо на использование комбинации
ингибиторов MEK и BRAF. При использовании
клеточной линии CT26 (мышиная опухоль
кишечника) в качестве модели, анти -PD1 терапия в
комбинации с ин гибиторами MEK дала
долговременный эффект контроля опухоли:
ингибиторы не влияли на функцию CD8 -клеток, но
способствовали выживанию эффекторных антиген -
специфичных Т -лимфоцитов, инфильтрировавших
опухоль [41, с. 609] . Сходным образом комбина ция
ингибиторов MEK и BRAF повышала
эффективность как адоптивной Т -клеточной
терапии, так и анти -PD1 блокады (БИСТ) [42, с.
279ra41 ]. Недавно были опубликованы три
исследования по одновременному применению
ингибиторов MAPK -каскада и БИСТ [43, с. 936; 44,
с. 941, 45, с. 929] . В двух работах использовали
дабрафениб (dabrafenib, ингибитор BRAF),
траметиниб (trametinib, ингибитор MEK) и анти -
PD1 антитело пембролизумаб (pembrolizumab), в
обоих случаях наблюдались (63% и 73%) сильные
(треть ей степени и выше) побо чные эффекты:
лихорадка , повышенный уровень трансаминазы и
сыпь. Один пациент умер от пневмонии [44, с. 941].
Третье исследование включало группу пациентов,
получавших комбинацию кобиметиниба
(cobimetinib, ингибитор MEK), вемурафениб а и
анти -PD -L1 антитела атезолизумаб (atezolizumab),
при этом 72% пациентов дали одинаковый ответ.
Вводная терапия кобиметинибом и вемурафенибом
привела к относительному повышению количества
пролиферирующих CD4 + T-клеток.
Потеря функции опухолевого супрес сора
PTEN
Хотя роль он косупрессоро в в онкогенезе была
описана довольно давно, открытие потери функции
PTEN как частой причины онкогенеза, было
сделано лишь в конце 20 -го столетия [46, с. 1943].
В одном из исследований была тщательно
проанализирована роль дисфункции PTEN (данный
ген бы л удалён) в меланоме человека и
аналогичной мышиной меланоме в отношении
эффек тивности иммунотерапии Т -клетками [47, с.
202]. В отсутствие PTEN опухолевые клетки были
более устойчивы к цитотоксическим опухоль -
специфичным Т -лимфоцитам как in vitro , т ак и in
vivo . При этом экспрессия PTEN (то есть при его
нормальной функции) коррелиро вала с ответом на
анти -PD1 терапию, с более высоким выходом
культивировавшихся ex vivo инфильтрировавших
опухоль лимфоцитов от пациента. В других
исследованиях наблюдались сходные эффекты,
вызванные потерей функции PTEN . Так, при
исследовании данных, полученных в ходе
секвенирования РНК из образцов саркомы мягких
тканей, было выявлено снижен ие экспрессии генов,
связанных с инфильтрацией Т -клеток и их
цитолитической активнос тью (таких как гены,
кодирующие CD8α и гранзим В) в опухолях с
делетированным PTEN . Более того, у пациента с
недостаточной реакцией на анти -PD1 БИСТ в той
части опухоли, ко торая не отвечала на терапию,
было выявлено отсутствие PTEN [48, с. 197] , что
предпо лагает рол ь дисфункционального
(делетированного) PTEN в развитии
резистентности к данной терапии. PTEN усиливает
передачу сигнала от интерферона типа I в ответ на
вирусный стимул, облегчая перенос в ядро
интерферон -регуляторного фактора 3 (interferon
regul atory factor 3, IRF3), а также в ответ на
активацию рецепторов распознавания паттерн ов
(РРП) ДНК -вирусами, РНК -вирусами,
полиинозил:полицитидиловыми кислотами и
полисахарид ами [49, с. 241] . Такое свойство PTEN
можно использовать в будущем для разработки
лекарств, направленных на РРП для преодоления
резисте нтности к БИСТ.
Ингибирование фосфоинозитид -3-киназы
(PI3K) было предложено в качестве
терапевтического подхода для усил ения
противоопухолевого иммунитета, поскольку PI3K
негативно регулируется PTEN угнет ая киназу. В
опухолях киназа чаще всего неправильно
регулируется. Однако, в опухолях (PI3Kα и PI3Kβ)
и иммунных клетках (PI3Kδ и PI3Kγ) активны
разные изоформы. Ингибирован ие изоформ PI3K,
преобладающих в опухолях, сдерживает рост
опухоли. Активация PI3Kγ в макрофагах
акт ивизирует иммуносупрессивную
транскрипционную программу, которая
препятствует противоопухолевой функции Т -
клеток независимо от опухоли [50, с. 437]. Влияет
ли ингибирование опухолевых PI3K на

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 19
противоопухолевую активность, остаётся пока
неяс ным.
Опухолевые дифференцированные и
стволовые клетки
Опухолевые стволовые клетки резистентны к
традиционным цитотоксическим агентам.
Появились доказательства, что диффер енцировка
или «стволовость» опухоли также играют роль в
возникновении резистентности к терапии,
основанной на иммунитете. Транскриптомный
анализ опухолей от пациентов с м еланомой,
резистентной к анти -PD1 БИСТ, выявил сигнатуру,
свойственную «стволоподобным »
мезенхимальным клеткам [40, с. 38]. У пациента,
который ответил на адоптивно внесён ные Т -клетки,
нацеленные на антиген дифференцировки
меланоцитов 1 ( melanocyte differentiation antigen 1,
MART1 ), рецидивировавшая опухоль потеряла
экспрессию MART1 – феном ен дифференцировки и
резистентности к иммунотерапии, который удалось
фенокопировать in vitro [51, с. 935]. В других
исследованиях было продемонстрировано, что
стволовые опухолевые клетки экспрессируют
отрицательные регуляторные молекулы, такие как
CD80 [52 , с. 1172], PD -L1 [53, с. 4047] и NKGD2 [54,
с. 254]. WNT -сигнальный каскад, ранее
оп исываемый как путь, используемый опухолью
для сопротивления иммунотерапии, играет важную
роль в дифференцировке и стволовости опухолей
[55, с. 1461].
БИОМАРКЕРЫ РЕЗИСТЕНТ НОСТИ
ОПУХОЛЕЙ
De novo опухоль -реактивные Т -клетки
Блокада иммунных сверочных точек
использует естественный противоопухо левый Т -
клеточный ответ. Наблюдения указывают на то, что
эффективность БИСТ зависит от
предсуществующиего иммунного ответа ( т. е. уже
развившегося ответа на опухоль до начала самой
проце дуры блокады ). Так, пациенты с мела номой –
опухолью, извес тной своей иммуногенностью,
давали очень хорошую реакцию на монотерапию
БИСТ [56, с. 371]. Меланома долгое время
использовалась в качестве модели для изучения
иммунотерапии. Клинический успех адопти вного
переноса клеток ( eх vivo разм ноже нных
лимофцитов, инфильтрировавших опухоль у
пациента) больным с метастазировавшей
меланомой является доказательством того, что у
этих пациентов уже (т. е. до стадии выделения
инфильтрировавших лимфоцитов) присутствов али
опухоль -специфичные Т -клетки [5 7, с. 850].
Самым простым индикатором
предсуществующего противоопухолевого
иммунного ответа можно считать наличие Т -клеток
в опухолевом микроокружении [58, с. 13765; 59, с.
1960]. У пациентов с меланомой, получавших анти -
PD1 терапию, присутствие Т -клеток в образцах
биопсии, полученной до н ачала лечения, было
ассоциировано с ответом на терапию , а плотность
CD8 + T-клеток на границе инвазии опухоли
являлась показателем силы ответа [60, 568] .
В исходных образцах от пациентов , которые
ответили на PD1 -блокаду, наблюдался
повышенный уровень фосфо рилированного STAT1
на границе инвазии. Это говорит о том, что ответ на
терапию требует не просто присутствия Т -клеток, а
активированных Т -клеток, производящих
интерферон γ (IFNγ), котор ый запускает
сигнальный каскад, вед ущий к фосфорилированию
STAT1 в сос едних опухолевых и стромальных
клетках. Это подтверждает роль описанного выше
характерного для опухоли IFNγ -сигнального
каскада в ответ на PD1 -блокаду. О подобных
результатах было сообще но в работе по изучению
анти -PD1 те рапии (pembrolizumab) у пациентов с
колоректальными опухолями, имевшими
неисправности в системе репарации неспаренных
оснований [61, с. 2509], а также у пациентов с
уротелиальной карциномой, получавших анти -PD -
L1 терапию [62, с. 544].
Однако наличие опухо ль-инфильтрирующих
лимфоцитов в самом начале не всегда связано с
ответом на анти -PD1 терапию, что наблюдали в
группе пациентов, получавших, либо не
получавших анти -CTLA4 терапию [63, с. 934] . Это
отчасти можно объяснить г етерогенностью и
неверными критерия ми отбора используемых для
анализа биопсий до начала терапии. Также следует
иметь в виду, что у пациентов, имевших опухоль -
специфичные Т -клетки, какие -то локальные
иммуносупрессивные факторы ограничили
инфильтрацию и эксп ансию этих клонов. В других
случаях опухоль -специфичные Т -клетки
прису тствовали на периферии опухоли, но не в
самом микроокружении опухоли [64, с. 1251] . В
этой работе было показано, что Т -клетки, начавшие
бороться с опухолью после получения анти -PD1
терап ии, оказались не клонами,
инфильтри ровавшими опухоль до начала терапии ,
а другими клонами, т.е. вошедшими в опухоль уже
после начала терапии. Такие результаты говорят о
том, что наличие инфильтрировавших опухоль
лимфоцитов не является однозначным
предсказа телем осуществления de novo
противо опухолев ого иммунного ответа.
PD - L1 как маркер интерефероновой
передачи сигнала
Было показано, что экспрессия молекул
иммунных сверочных точек, таких как PD -L1, в
клетках микроокружения опухоли является
предсказательным фактором в отношении ответа на
БИ СТ, хотя и не во всех случаях [65, с. 2443; 66, с.
2018]. Экспрессия PD -L1 не обяза тельно
свидетельствует о наличии противоопухолевого
ответа (предсуществующего). Так, некоторые
пациенты с PD -L1 -положительными опухолями не
дали ответа на терапию, а пациент ы с PD -L1 -
отрицательными опухолями дали ответ на терапию
БИСТ [67, с. 122; 68, с. 3 20; 69, с. 1976].
Экспрессия PD -L1 регулируется через
интерферон -сигнальный каскад, который включает
киназы JAK1 и JAK2, транскрипционные факторы
STAT1, STAT2 и STAT3 и тра нскрипционный
активатор IRF1. IFNγ способен стимулировать

20 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
экспрессию PD -L1 даже на экзосомах опухолевого
происхождения, что приводит к супрессии CD8 + T-
клеток [70, с. 382]. Поскольку в данном случае
инфильтрировавшие опухоль Т -клетки
сосуществуют с PD -L1 -экспрессирующими
опухолевыми и/или иммунными клетками, блокада
PD1 –PD -L1 -сигнального пути может быть
успешной (рис. 1а), что ещё раз подчеркивает роль
присущего опухоли IFNγ сигнального пути в ответе
на PD1 -блокаду.
Оба интерфероновых сигнальных пути – как
типа I, так и типа II (IFNγ) конвергиру ют на
активации генов -мишеней, а именно PDL 1. В то
время как интерфероны типа I синтезируются
преимущественно миелоидными клетками в ответ
на активацию РРП, интерферон типа II
синтезируется в основном Т -клетками при
распознавании схожих антигенов. Таким образом, в
контексте основанного на Т -клетках
противоопухолевого иммунитета, интерферон типа
II играет более важную роль. Из -за мутаций в
интерферон -сигнальных путях (особенно в пути
второго типа), либо вследствие эпиг енетических
или пост -транскрипционных механизмов,
ограничивающих экспрессию PD -L1 в опухоли,
PD -1–PD -L1 БИСТ может быть неэффективной
(рис. 1b ).
Экспрессия PD -L1 регулируется и другими
механизмами. Сюда можно включить избыточную
экспрессию (из -за амплифик ации локусов PD -L1,
PD -L2 и JAK2, известную как PDJ -амплификация
[71, с. 2835]), эп игенетическое подавление,
транскрипционное регулирование (например,
посредством MYC, PTEN и индуцируемом
гипоксией фактором 1α (HIF 1α)),
посттранскрипционное регулирование (с помощью
микроРНК), посттрансляционную модификацию
(гликозилирование, фосфорилиро вание и
убиквитинилирование), а также перемещение из
цитоплазмы в эндосомы.
Результаты изучения опухолевого
транскриптома
Применявшиеся долгое время о снованные на
иммуноги стохимии методы оценк и
иммунологического статуса опухолей ограничены
по своим возмо жностям, что способствовало
появлению мультиплексных подходов. Примерами
таких новых методов можно считать
секвенирование РНК и чипы для исследования
определенных генов. Нов ые методики в
использовании алгоритмов деконволюции РНК
(расшифровки функций РНК), таких как оценка
цитолитической активности, MCP -счётчик
(подсчёт популяции клеток в микроокружении),
CIBERSORT и TIMER [72, с. 453; 73, с. 218],
позволяют оценить состав имм унных клеток в
образце опухоли. Подсчёт цитолитической
активности – это самый прост ой метод
деконволюции РНК, он позволяет определить
состав эффекторных Т -клеток в опухоли, используя
геометрические данные по экспрессии гранзима А
и перфорина [74, с. 48]. Б олее высокие значения
цитолитической активности коррелируют с
ответом на анти -CTLA4 БИСТ.
Однако, иммунные сигнатуры из препаратов
тотальной РНК опухоли имеют и недостатки.
Гетерогенность опухоли затрудняет получение
воспроизводимых и согласованных резуль татов.
Для устранения трудностей, возникающих при
исследовании тотальной РНК из оп ухолей,
применяется секвенирование РНК одиночных
клеток. Анализ 48 образцов биопсии опухоли от 32
пациентов, получивших БИСТ, показал, что
инфильтрация CD8 + T-клетками (это было
определено н а основе иммуногистохимического
анализа) была невысокой в опухолях до получения
терапии у пациентов, давших ответ на неё. Однако
секвенирование РНК одиночных клеток показало,
что CD8 + T-клетки от респондеров ( т. е.
ответивших на терапию ) д о н ачала терапии были
обогащены транскриптами, относящимися к
дифференцировке (напр имер, мРНК
транскрипционного фактора TCF7 ), активации и
выживанию клеток памяти по сравнению с CD8 + T-
клетками у нон -респондеров: эти клетки были
обогащены транскриптами ген ов истощения [75, с.
998].
Опухолевые неоантигены как мишени Т -
клеток
Несмотря на доказательства того, что
осуществляемый Т -клетками неоантиген -
специфический ответ играет центральную роль в
эффективности БИСТ, набор мутаций в опухоли
ограничивает ответ на БИСТ [76, с. 665]. Это
частично объясняется клональностью
интересующих мутаций [77 , с. 1463].
Чтобы мутация стала мишенью иммунитета,
она должна быть эффективно представлена
иммунной системе с помощью главного комплекса
гистосовместимости (MHC). И хотя са ми методы
оценки неоантигенов улучшились, этот способ
недостаточно эффективен [78, с. 815].
Преодоление резистентности опухолей
При комбинировании анти -CTLA4 и анти -PD1
блокады наблюдается значительно более сильный
противоопухолевый иммунный ответ, чем пр и
использовании компонентов по отдельности.
Транскриптомные и иммуногистохимически е
данные свидетельствуют о том, что у пациентов,
ответивших на двойную БИСТ, до терапии уже был
продуктивный противоопухолевый иммунный
ответ, который сдерживался иммунными
сверочными точками (рис. 3a) и был ниже уровней,
достигнутых при одновременной блокаде PD1 –PD -
L1 и CTLA4. На стадии преклинических или
клинических испытаний находится несколько
ингибиторов альтернативных иммунных
сверочных точек, включая нацеленные на LAG3,
VISTA, TIM3, аденозиновый рецептор A2A, CD73,
BTLA, B7 -H3, B7 -H4 и иммуноглобулин -подобный
рецептор киллерных клеток [79, с. 1069].
У ряда пациентов необходимо инициировать
противоопухолевый иммунный ответ путём
увеличения (усиления) презентации антигено в и

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 21
праймирования иммунног о ответа против уже
существующих у них антигенов.
Опухоль и дренирующие её лимфатические
узлы можно рассматривать как превалирующие
места презентации опухолевых антигенов [80, с.
855] , поэтому подходы, нацеленные на
модулирование презентации антигена в оп ухоли
или в лимфатических узлах представляют интерес
(рис. 3b ). Данные подходы основаны на 1)
индукции провоспалительного состояния, которое
разрушает основные механизмы иммуносупрессии
в опухолевом микроокружении; 2) индукции
имм уногенной клеточной смерти и 3) привлечении
профессиональных антиген -презентирующих
клеток (АПК) для эффективного праймирования
против опухолевых антигенов. Примером может
служить интраопухолевый иммунный стимулянт -
бактерия Кальметт -Герен – БЦЖ -вакцина,
являющаяся стандартной тер апией для
поверхностного рака мочевого пузыря [81, с. 153].
Как хемо -, так и радиотерапия способны
индуцировать иммуногенную клеточную смерть
[82, с. 365; 83, с. 51]. На мышиных моделях было
показано, что иммунный эффект как хемо -, так и
радиотерапии зависит от Т -клеток, и оба эти вида
терапии повышают эффективност ь БИСТ [84, с.
1050; 85, с. 373].

Рис . 3. Преодоление опухолевой резистентности к блокаде иммунных сверочных точек .

22 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
a – PD - L1 может быть не единственным отрицательн ым регулятором противоопухолевого T-
клеточного ответа . Другие молекулы в иммунных сверочных точках, экспрессируемые на поверхности
опухолевых клеток, либо же миелоидные клетки в микроокружении опухоли предотвращают
эффективный противоопухолевый иммунитет. Комбинированная БИСТ разрушает механизм
резистентности (панель справа).
b – в имм унологически холодных типах опухолей противоопухолевый Т -клеточный ответ изначально
не развивается, что делает неэффективной БИСТ. Иммунную систему можно праймированить проти в
опухоли либо за счёт иммуногенной клеточной смерти (онколитические вирусы или ци тотоксическая
терапия) , либо путем праймирования антиген -презентирующих клеток (использовать агонисты толл -
подобных рецепторов и агонисты CD40) , либо же повышая чувствительно сть опухолевых клеток к
дцРНК (путем ингибирования дцРНК -специфичной аденозиндезам иназы (ADAR1)) . Такое праймирование
способно перепрограммировать иммунологически холодные опухоли и привести их к отклику на БИСТ .
c – опухоли с нарушенной IFNγ -сигнализацие й не способны к экспрессии PD - L1 в ответ на IFNγ. В
некоторых опухолях (в которых MHC I -зависимая презентация антигена зависит в основном от IFNγ -
сигнального пути) разрушение IFNγ -сигнализации равносильно утрате презентации антигена. Активация
альтернатив ного интерферонового пути (интерферон первого типа ) посредством агонистов TLR (толл -
подобных рецепторов) , с помощью онколитических вирусов или другими способами, приводит к
активации передачи сигнала через STAT1 и STAT2, что запускает транскрипцию генов, к одирующих PD -
L1 и MHC I за счёт активации интерферо нового регулятора IRF1.
d – опухоли, резистентные к БИСТ из -за потери экспрессии экспрессии MHC I вследствие
генетических изменений (потеря β2-микроглобулина (B2M) и потеря HLA -гетерозиготности ). В данно й
ситуац ии успешны три подхода: (1) Т-клетки с химер ными антигеновыми рецепторами (CAR)
распознают свои мишени независимо от экспрессии MHC I; (2) адоптивный перенос натуральных
киллеров (NK) , или их стимуляция цитокинами, такими как IL-2 или IL-15, поскол ьку в данных клетках
нет экспрессии MHC I; (3) вакци нация или адоптивная Т -клеточная терапия для запуска ответа против
специфичного антигена MHC II -зависимым путём.
B2M - β2-microglobulin; DC - dendritic cell ( дендритные клетки ); GAS - IFN γ activation site s; IFNAR1 -
interferon - α and β receptor subunit 1; IFN γR - IFN γ receptor; JAK1 - Janus kinase 1; TCR - T cell receptor.

В то же время хемо - и радиотерапия оказывают
(это задокументировано) иммуносупрессивный
эффект, который приводит в работу не зависящи й
от самой опухоли (то есть внешний по отношению
к опухоли) механизм резистентности к
иммунотерапии [86, с. 1659]. Таким образом,
маловероятно, что эти виды стандартной терапии
станут основными в преодолении
внутриопухолевого механизма сопротивления
иммунн ой блокаде, но их роль в контроле тяжес ти
болезни и способствовании иммуногенной смерти
клеток может оказаться полезной в комбинации с
иммунотерапией.
Некоторые подходы в иммунотерапии
направлены на РРП. В них используются
онколитические вирусы или их ими тация. Вирус
можно имитировать с помощь ю таких веществ, как
полиинозиловая:полицитидиловая кислота ,
которая имитирует дцРНК и активирует TLR3,
MDA5 и RIG -I; либо можно использовать CpG
олигонуклеотиды, которые имитируют
одноцепочечную ДНК и активируют TLR9 .
Активация РРП ведёт в свою очередь к активации
провоспалительных генов, включая гены,
кодирующих интерфероны первого типа, а это
запускает каскад, привлекающий и активирующий
антигенпрезентирующие клетки (АПК) (например,
дендритные клетки). Именно они вы полняют
важнейшую функцию – инициацию
противоопухолевого иммунного ответа [87, с. 417].
Онколитические вирусы обладают уникальной
способностью: они заражают опухолевые клетки и
вызывают их гибель. Их часто генетически
модифицируют в терапевтических целях д ля
усиления противоопухолевого иммунног о ответа.
Основой препарата талимоген лагерпарепвек
(talimogene laherparepvec, или T -VEC, торговое
название Imlygic ) является вирус простого герпеса
первого типа. Данный препарат вводится в опухоль
пациентам с метаста тической меланомой, вирус
размножается преимущественно внутри
опухолевых клеток, которые начинают
экспрессировать цитокин ГМ -КСФ,
способствующий созреванию и активации АПК,
находящихся поблизости [88, с. 341]. T -VEC не
мешает презентации антигена в инфицир ованных
клетках (в отличие от вирусного вектора, на основе
которого создан препарат). В комбинации с анти -
PD1 терапией, T -VEC дал положительный
результат 62% в исследовании [89, с. 1031] (стадия
Ib) с участием пациентов с метастатической
меланомой – намног о большее значение, чем
можно было бы о жидать от просто анти -PD1
терапии . Стоит отметить, что 9 из 13 пациентов с
низким количеством инфильтрировавших опухоль
CD8 + T-клеток также дали хороший результат, а 3
из 5 пациентов с изначально низким уровнем IFNγ
дали полный ответ, подтверждая роль T -VE C у
пациентов без предсуществовавшего
(отсутствовавшего до начала терапии)
противоопухолевого иммунного ответа.
Предположительный механизм: вызванная
вирусом иммуногенная гибель клеток приводит к
доступности пептидных антигенов. Сенсоры
врожденного иммунит ета к вирусным антигенам
запускают интерфероновый (IFNγ) каскад; это,
совместно с усиленной экспрессией ГМ -КСФ (из -за
T-VEC) привлекает и активирует АПК в

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 23
микроокружение опухоли. АПК затем либо
праймируют, либо активи руют опухоль -
специфичные Т -клетки в опу холевом
микроокружении или в дренирующих
лимфатических сосудах, что приводит к отмене
опухолевого иммунного исключения.
Методы повышения иммуногенности
опухолей разработаны с использованием
активаторов РРП, таких как SD -101 –
синтетического олигонуклеотид а с CpG -
последовательностями. Этот олигонуклеотид
активирует передачу сигнала через TLR9 (толл -
подобный рецептор 9) как в опухолевых, так и в
неопухолевых клетках микроокружения опухоли. В
фазе Ib исследования [90, с. 1250] 78% пациентов с
меланомой, не пр оходивших лечение анти -PD -1,
дали объективный ответ. Преклинические
испытания на мышиных моделях подтверждают
использование агониста рецептора TLR9 (SD -101)
для индукции системного противоопухолевого
иммунитета [91, с . 3437; 92, с. 541]. К таким
испытаниям можно отнести комбинацию SD -101 и
агонистического антитела OX40, оказавшуюся
эффективной на множестве моделей (включая
модель спонтанного метастатического рака
молочной железы у мышей) [93, с. eaan4488].
Агонисты сен соров врожденного иммунитета
(которые я вляются мощными индукторами
сигнализации интерферона первого типа)
стимулируют презентацию антигена в опухолях,
имеющих резистентность к БИСТ из -за
генетических или эпигенетических нарушений в
передаче сигнала от инте рферона второго типа
(рис. 3c).
Восприи мчивость к БИСТ опухолевых клеток
тонко регулируется их чувствительностью к
эндогенным сигналам врожденного иммунитета,
таким как эндогенная дцРНК. Усиление
чувствительности опухолевых клеток к дцРНК –
направление, ко торое приведет к преодолению
выработанн ой опухолью резистентности к БИСТ.
Использование CRISPR скрининга по более 2300
генов в клетках мышиной меланомы показало, что
в опухолях, лучше отвечавших на анти -PD1 и
GVAX, потеря гена ADAR1 (фермент
редактирования РНК, который конвертиру ет
адеонизин в инозин) происходит чаще. Потеря
ADAR1 в клетках мышиной меланомы B16
приводила к отмене иммунологически холодного
статуса опухолевого микроокружения и повышала
чувствительность опухолевых клеток к прямому
противоопухо левому эффекту интерферонов
первого или второго типа [94, с. 43]. Улучшенный
ответ на анти -PD1 терапию в ADAR1 -дефицитных
опухолях зависел от наличия, по крайней мере,
одного из двух сенсоров дцРНК - MDA5 и PKR.
Сенсоры врожденного иммунитета играют
извес тную роль в иммунологической реактивнос ти
в сверочных точках [95, с. 1637], но они могут не
работать при определенных условиях. В
протоковой аденокарциноме поджелудочной
железы наблюдается минимальная инфильтрация
Т-клетками и плохой ответ на БИСТ [96, с. 418].
Комбинация химиотерапии, агониста
костимуляторного белка CD40 и анти -PD1 терапия
показали антиопухолевую эффективность Т -клеток
на мышиной модели рака поджелудочной железы
[97, с. 2719]. CD40 экспрессируется на многих
клетках иммунной системы, включа я дендритные
клетки. При его взаимодейс твии с CD40 -лигандом
начинается презентация антигена [98, с. 265]. В
комбинации с химио - и анти -PD1 терапией,
активация CD40 и вызываемая химиотерапией
иммуногенная смерть клеток стимулируют
активацию Т -клеток (за счё т BATF3 + дендритных
клеток), не зависящ ую от сигнальных каскадов
врожденного иммунитета (включая передачу
сигнала через MYD88, TLR4, TRIF, TLR3, STING,
P2X74, каспазу 1 и каспазу 11). В настоящее время
ведутся клинические испытания (фаза I/II)
комбинации C D40 -агониста, химиотерапии и анти -
PD1 т ерапии ( ClinicalTrials.gov , NCT03214250).
По меньшей мере, два подхода, основанные на
иммунитете, изучаются сейчас для пациентов с
опухолями, имеющими генетические дефекты в
презентации антигена комплексами MHC I или II
(рис. 3d) . Основанная на методе ex vivo
модификации Т -клеток самого пациента для
экспрессии ими химерных антигеновых рецепторов
(CAR -T) терапия является мощным инструментом
при лечении гематологических злокачественных
опухолей; в данной терапии не нужн а презентация
антигена посредством MHC, пос кольку
модифицированные Т -лимфоциты напрямую
нацелены на специфические поверхностные
молекулы, экспрессируемые опухолевыми
клетками. При лечении солидных опухолей успех
данной терапии намного скромнее. Это
объясня ется немногочисленностью
опухольспецифическ их поверхностных антигенов
и иммуносупрессивным микроокружением. Новый
подход по созданию CAR T -клеток даёт надежду на
положительный результат [99, с. 229].
Использование натуральных киллеров (NK),
элиминирующих к летки с отсутствующими
молекулами MHC I – это подход к лечению
опухолей, дефицитных по MHC [100, с. 237]. B2M -
дефицитные клетки линии B16 с
нефункционирующим ADAR,
сенсибилизированные к комбинации GVAX и анти -
PD1 терапии, усиленно инфильтрировались NK -
клет ками [94, с. 44]. Адоптивная терапия NK -
кле тками разрабатывается в течение нескольких
лет, и недавно блокада NKG2A – ингибиторного
белка, экспрессирующегося как на NK -, так и на Т -
клетках, показала хорошие результаты у пациентов
со сквамозноклеточной карци номой головы и шеи
[101, с. 1731].

24 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
Рис . 4. Онкогенные сигнальные пути, влияющие на противоопухолевый иммунитет и резистентность к
БИСТ
a – онкогенные сигнальные пути обеспечивают уникальный механизм, позволяющий опухоли избегать
иммунного ответа. Здесь приведены четыре основных онкогенных сигнал ьных пути, вовлечённых в
противоопухолевый иммунитет: MAPK -сигнальный каскад, WNT –β-катениновый каскад, CDK4 –CDK6
сигнали зация (циклинзависимые протеинкиназы), а также каскады, активируемые в результате утраты
функции фосфоинозитид фосфатазы PTEN.
b – тер апевтическое разрушение CDK4 –CDK6 сигнализации (например, с помощью пальбоциклиба
или абемациклиба ), MAKP -сигнализации (ингибиторами BRAF) , либо же передачи сигнала в WNT -
сигнальном каскаде отменяют исключение Т -клеток опухолью и восстанавливают чувствител ьность к
БИСТ .
BATF3 - basic leucine zipper transcriptional factor ATF - like 3;
CCL4 - CC - chemokine ligand 4;
DNMT1 – DNA (cytosine -5)-methyltransferase 1;
дцРНК – двухцепочечная РНК ;
PAMP - pathogen - associated molecular patterns; T reg клетки , регуляторные T клетки .

Для выяснения механизмов резистентности к
БИСТ, вырабатывающейся за счет онкогенов (рис.
4a), исследо ватели использовали уже
существующие ингибиторы онкогенных
сигнальных путей для подстёгивания
противоопухолевого иммунитета (особен но в
комбинации с БИСТ). К ним относятся ингибиторы
WNT -каскада, ингибиторы киназ CDK4 и CDK6, а
также ингибиторы киназ MAPK и PI3K (рис. 4b ).
Заключение
В процессе выявления механизмов
резистентности к БИСТ были переоткрыты
основные механизмы, регулирующ ие
противоопухолевый иммунитет. Чувствительность
опухоли к БИСТ определяется биологией опухоли:
у пациентов с опухолями, имеющ ими сходные
гистологические, молекулярные и генетические
свойства, наблюдается одинаковый ответ на БИСТ.
Опухоли, которые активиру ют противоопухолевый
иммунный ответ de novo (из -за большого
количества мутаций в них и как следствие
повышенной антигенности), будут лучше
реагировать на лечение с помощью БИСТ. Однако
даже при достаточной антигенности,
чувствительность к БИСТ нарушается п ри
генетических дефектах в IFNγ -каскаде и
презентации антигена в опухоли.
Онкогенные сигнальные пути (за счёт
привлечения кле ток, критических для запуска и
осуществления противоопухолевого иммунного
ответа) воздействуют на IFNγ и презентацию
антигена, либ о же включают иммуноподавляющие
факторы в микроокружении опухоли, поэтому эти
сигнальные пути можно также считать
медиаторами резистентности к БИСТ. Подходы в
терапии, направленные на обход дефектов в IFNγ -
каскаде или в презентации антигена, а также
нацеле нные на блокировку иммуносупрессивных
онкогенных сигнальных каскадов, поддерживают
надежду на распространение в клинической
пр актике метода БИСТ.

Список литературы
1. Chowell D. et al. Patient HLA class I
genotype influences cancer response to checkpoint
blo ckade immunotherapy // Science -2018. -№ 359. – с.
582

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 25
2. Fessler J. et al. Exploring the emerging role
of the microbiome in canc er immunotherapy // J.
Immunother. Cancer -2019. -№ 7. – с. 108
3. Rizvi N. A. et al. Mutational landscape
determines sensitivity to PD -1 blockade in non - small
cell lung cancer // Science -2015. -№ 348. – с. 124
4. Snyder A. et al. Genetic basis for clinical
response to CTLA -4 blockade in melanoma // N. Engl.
J. Med. -2014. -№ 371. – с. 2189
5. van Rooij N. et al. // Tumor exome analysis
reveals neoantigen - specific T - cell reactivity in an
ipilimumab -responsive melanom a. J. Clin. Oncol. -
2013. -№ 31. – с. e439
6. Tra n E. et al. Cancer immunotherapy based
on mutation - specific CD4+ T cells in a patient with
epithelial cancer // Science -2014. -№ 344. – с. 641
7. Ott P. A. et al. An immunogenic personal
neoantigen vaccine for p atients with melanoma //
Nature -2017. -№ 547. – с. 217
8. Dighe A. S. et al. Enhanced in vivo growth
and resistance to rejection of tumor cells expressing
dominant negative IFN gamma receptors // Immunity -
1994. №1, – с. 447
9. Kaplan D. H. et al. Demonstration of an
interferon gamma - dependent tumor surve illance
system in immunocompetent mice // Proc. Natl Acad.
Sci. USA -1998. -№ 95. – с. 7556
10. Manguso R. T. et al. In vivo CRISPR
screening identifies Ptpn2 as a cancer immunotherapy
target // Nature -2017. -№ 54 7. – с. 413
11. Patel S. J. et al. Identification of essential
genes for cancer immunotherapy // Nature -2017. -№
548. – с. 537
12. Pan D. et al. A major chromatin regulator
determines resistance of tumor cells to T cell - mediated
killing // Science -2018. -№ 359. – с. 770
13. Zaretsky J. M. et al. Mutations asso ciated
with acquired resistance to PD -1 blockade in melanoma
// N. Engl. J. Med. -2016. -№ 375. – с. 819
14. Gao J. et al. Loss of IFN - γ pathway genes in
tumor cells as a mechanism of resistance to anti -
CTLA -4 th erapy // Cell -2016. -№ 167. – с. 397
15. Wilson E . B. et al. Blockade of chronic type
I interferon signaling to control persistent LCMV
infection // Science -2013. -№ 340. – с. 202
16. Benci J. L. et al. Tumor interferon signaling
regulates a multigenic resistance program to immune
checkpoint blockade // Cel l -2016. -№ 167. – с. 1540
17. Bach E. A. et al. The IFN gamma receptor: a
paradigm for cytokine receptor signaling // Annu. Rev.
Immuno l. -1997. -№ 15. – с. 563
18. Sucker A. et al. Acquired IFN γ resistance
impairs anti -tumor immunity and gives rise to T -cell -
res istant melanoma lesions // Nat. commun. -2017. -№
8. – с. 15440
19. Shankaran V. et al. IFN γ and lymphocytes
prevent primary tumour deve lopment and shape tumour
immunogenicity // Nature -2001. -№ 410. – с. 1107
20. Restifo N. P. et al. Identification of human
canc ers deficient in antigen processing // J. Exp. Med.
-1993. -№ 177. – с. 265
21. Restifo N. P. et al. Loss of functional beta 2 -
microglob ulin in metastatic melanomas from five
patients receiving immunotherapy // J. Natl. Cancer
Inst. -1996. -№ 88. – с. 100
22. Suck er A. et al. Genetic evolution of T -cell
resistance in the course of melanoma progression //
Clin. Cancer Res. -2014. -№ 20. – с. 65 93
23. McGranahan N. et al. Allele - specific HLA
loss and immune escape in lung cancer evolution // Cell
-2017. -№ 171. – с. 125 9
24. Grasso C. S. et al. Genetic mechanisms of
immune evasion in colorectal cancer // Cancer Discov.
-2018. -№ 8. – с. 730
25. Huang L. et al. The RNA - binding protein
MEX3B mediates resistance to cancer immunotherapy
by downregulating HLA - A expression // Clin. Cancer
Res. -2018. -№ 24. – с. 3366
26. Yaguchi T. et al. Immune suppression and
resistance mediated by constitutive activation of
Wnt/ β-catenin signaling in human melanoma cells // J.
Immunol. -2012. -№ 189. – с. 2110
27. Zhao F. et al. Paracrine Wnt5a - β-catenin
signaling triggers a metabolic program that drives
dendritic cell tolerization // Immunity -2018. -№ 48. –
с. 147
28. Jimenez -Sanchez A. et al. Heterogeneous
tumor -immune microenvironments among
differentially growing metastases in an ovarian cancer
patient / / Cell -2017. -№ 170. – с. 927
29. Sridharan V. et al. Immune profiling of
adenoid cystic carcinoma: PD - L2 expression and
associations with tumor - infiltrating lymphocytes //
Cancer Immunol. Res. -2016. -№ 4. – с. 679
30. Seiwert T. Y. et al. Integrative and
comp arative genomic analysis of HPV - positive and
HPV - negative head and neck squamous cell
carcinomas // Clin. Cancer Res. -2015. -№ 21. – с. 632
31. Sweis R. F. et al. Molecular drivers of the
non -T-cell -inflamed tumor microenvironment in
urothelial blad der canc er // Cancer Immunol. Res. -
2016. -№ 4. – с. 563
32. Abril - Rodriguez G. T. et al. PAK4
inhibition reverses immune cell exclusion and
overcomes resistance to checkpoint blockade therapy
[abstract O39, электронный ресурс ]. – 2018. Режим
доступа: URL:
https://si tc.sitcancer.org/2018/abstracts/titles/?category
=Mechanisms+of+Resistance+to+Immunotherapy
33. Hunter T. et al. Cyclins and cancer // Cell -
1991. -№ 66. – с. 1071
34. Deng J. et al. CDK4/6 inhibition augments
antitumor immunity by enhancing T - cell activa tion //
Cancer Discov. -2018. -№ 8. – с. 216
35. Jerby -Arnon L. et al. A cancer cell program
promotes T cell exclusion and resistance to checkpoint
blockade // Cell -2018. -№ 175. – с. 984
36. Sumimoto H. et al. The BRAF - MAPK
signaling pathway is essential for ca ncer - im mune
evasion in human melanoma cells // J. Exp. Med. -
2006. -№ 203. – с. 1651
37. Boni A. et al. Selective BRAFV600E
inhibition enhances T - cell recognition of melanoma
without affecting lymphocyte function // Cancer Res. -
2010. -№ 70. – с. 5213

26 Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20
38. Freder ick D. T . et al. BRAF inhibition is
associated with enhanced melanoma antigen
expression and a more favorable tumor
microenvironment in patients with metastatic
melanoma // Clin. Cancer Res. -2013. -№ 19. – с. 1225
39. Acquavella N. et al. Type I cytokines
syn ergize w ith oncogene inhibition to induce tumor
growth arrest // Cancer Immunol. Res. -2015. -№ 3. – с.
37
40. Hugo W. et al. Genomic and transcriptomic
features of response to anti -PD -1 therapy in metastatic
melanoma // Cell -2016. -№ 165. – с. 35
41. Ebert P. J. R. et a l. MAP kinase inhibition
promotes T cell and anti -tumor activity in combination
with PD -L1 checkpoint blockade // Immunity -2016. -
№ 44. – с. 609
42. Hu -Lieskovan S. et al. Improved antitumor
activity of immunotherapy with BRAF and MEK
inhibitors in BR AF(V600E ) melanoma // Sci. Transl.
Med. -2015. -№ 7. – с. 279 ra41
43. Ribas A. et al. Combined BRAF and MEK
inhibition with PD -1 blockade immunotherapy in
BRAF -mutant melanoma // Nat. Med. -2019. -№ 25. –
с. 936
44. Ascierto P. A. et al. Dabrafenib, trametinib
and pembrol izumab or placebo in BRAF - mutant
melanoma // Nat. Med. -2019. -№ 25. – с. 941
45. Sullivan R. J. et al. Atezolizumab plus
cobimetinib and vemurafenib in BRAF - mutated
melanoma patients // Nat. Med. -2019 . -№ 25. – с. 929
46. Li J. et al. PTEN, a putative protein tyrosine
phosphatase gene mutated in human brain, breast, and
prostate cancer // Science -1997. -№ 275. – с. 1943
47. Peng W. et al. Loss of PTEN promotes
resistance to T cell - mediated immunotherapy // C ancer
Discov. -2016. -№ 6. – с. 202
48. George S. et al. Los s of PTEN is associated
with resistance to anti - PD -1 checkpoint blockade
therapy in metastatic uterine leiomyosarcoma //
Immunity -2017. -№ 46. – с. 197
49. Li S. et al. The tumor suppressor PTEN has
a c ritical role in antiviral innate immunity // Nat.
Immuno l. -2016. -№ 17. – с. 241
50. Kaneda M. M. et al. PI3Kgamma is a
molecular switch that controls immune suppression //
Nature -2016. -№ 539. – с. 437
51. Mehta A. et al. Immunotherapy resistance by
inflammation - induced dedifferentiation // Cancer
Discov. -2018. -№ 8. – с. 935
52. Miao Y. et al. Adaptive immune re sistance
emerges from tumor - initiating stem cells // Cell -2019.
-№ 177. – с. 1172
53. Castagnoli L. et al. WNT signaling
modulates PD - L1 expression in the stem cell
compartment of triplenegative breast cancer //
Oncogene -2019. -№ 38. – с. 4047
54. Paczulla A. M. et al. Absence of NKG2D
ligands defines leukaemia stem cells and mediates their
immune evasion // Nature -2019. -№ 572. – с. 254
55. Zhan T. et al. Wnt signaling in cancer //
Oncogene -2017. -№ 36. – с. 1461
56. Men shawy A. et al. Nivolumab
monotherapy or in co mbination with ipilimumab for
metastatic melanoma: systematic review and meta -
analysis of randomized - controlled trials // Melanoma
Res. -2018. -№ 28. – с. 371
57. Dudley M. E. et al. Cancer regression and
autoimm unity in patients after clonal repopulation wi th
antitumor lymphocytes // Science -2002. -№ 298. – с.
850
58. Zeng D. Q. et al. Prognostic and predictive
value of tumor - infiltrating lymphocytes for clinical
therapeutic research in patients with non -small cell
lung cancer // Oncotarget -2016. -№ 7. – с. 13765
59. Galon J. et al. Type, density, and location of
immune cells within human colorectal tumors predict
clinical outcome // Science -2006. -№ 313. – с. 1960
60. Tumeh P. C. et al. PD -1 blockade induces
responses by inhibiting adaptive immune resistance //
Natu re -2014. -№ 515. – с. 568
61. Le D. T. et al. PD -1 blockade in tumors with
mismatch repair deficiency // N. Engl. J. Med. -2015. -
№ 372. – с. 2509
62. Mariathasan S. et al. TGF β attenuates
tumour response to PD - L1 bl ockade by contributing to
exclusion of T cells // Nature -2018. -№ 554. – с. 544
63. Riaz N. et al. Tumor and microenvironment
evolution during immunotherapy with nivolumab //
Cell -2017. -№ 171. – с. 934
64. Yost K. E. et al. Clonal replacement of
tumor - specific T cells following PD -1 blockade // Nat.
Med. -2019. -№ 25. – с. 1251
65. Topalian S. L. et al. Safety, activity, and
immune correlates of anti - PD -1 antibody in cancer //
N. Engl. J. Med. -2012. -№ 366. – с. 2443
66. Garon E. B. et al. Pembrolizumab for the
treat ment of non -small -cell lung cancer // N. Engl. J.
Med. -2015. -№ 372. – с. 2018
67. Wolchok J. D. et al. Nivolumab plus
ipilimumab in advanced melanoma // N. Engl. J. Med.
-2013. -№ 369. – с. 122
68. Robert C. et al. Nivolumab in previously
untreated melanoma with out BRAF mutation // N.
Engl. J. Med. -2015. -№ 372. – с. 320
69. Forde P. M. et al. Neoadjuvant PD -1
blockade in resectable lung cancer // N. Engl. J. Med. -
2018. -№ 378. – с. 1976
70. Chen G. et al. Exosomal PD - L1 contributes
to immunosuppression and is associa ted with anti - PD -
1 response // Nature -2018. -№ 560. – с. 382
71. Ribas A. et al. What does PD - L1 positive or
negative mean? // J. Exp. Med. -2016. -№ 213. – с. 2835
72. Newman A. M. et al. Robust enumeration of
cell subsets from tissue expression profiles // Na t.
Methods -2015. -№ 12. – с. 453
73. Becht E. et al. Estimating the population
abundance of tissue - infiltrating immune and stromal
cell populations using gene express ion // Genome Biol.
-2016. -№ 17. – с. 218
74. Rooney M. S. et al. Molecular and genetic
propert ies of tumors associated with local immune
cytolytic activity // Cell -2015. -№ 160. – с. 48
75. Sade -Feldman M. et al. Defining T cell
states associated with response to checkpoint
immunotherapy in melanoma // Cell -2018. -№ 175. – с.
998

Национальная ассоциация ученых (НАУ) # 51, 20 20 27
76. Nishino M. et al. Mo nitoring immune -
checkpoint blockade: response evaluation and
biomarker development // Nat. Rev. Clin. Oncol. -2017.
-№ 14. – с. 655
77. McGranahan N. et al. Clonal neo antigens
elicit T cell immunoreactivity and sensitivity to
immune checkpoint blockade // Sci ence -2016. -№ 351.
– с. 1463
78. Vitiello A. et al. Neoantigen prediction and
the need for validation // Nat. Biotechnol. -2017. -№ 35.
– с. 815
79. Wei S. C. et al. Funda mental mechanisms of
immune checkpoint blockade therapy // Cancer Discov.
-2018. -№ 8. – с. 1069
80. Gardner A. et al. Dendritic cells and cancer
immunity // Trends Immunol. -2016. -№ 37. – с. 855
81. Redelman -Sidi G. et al. The mechanism of
action of BCG therapy for bladder cancer – a current
perspective // Nat. Rev. Urol. -2014. -№ 11. – с. 153
82. Weichse lbaum R. R. et al. Radiotherapy and
immunotherapy: a beneficial liaison? // Nat. Rev. Clin.
Oncol. -2017. -№ 14. – с. 365
83. Kroemer G. et al. Immunogenic cell death i n
cancer therapy // Annu. Rev. Immunol. -2013. -№ 31. –
с. 51
84. Apetoh L. et al. Toll - like re ceptor 4 -
dependent contribution of the immune system to
anticancer chemotherapy and radiotherapy // Nat. Med.
-2007. -№ 13. – с. 1050
85. Twyman -Saint Victor C. et al. Radiation and
dual checkpoint blockade activate non - redundant
immune mechanisms in cancer / / Nature -2015. -№ 520.
– с. 373
86. Seifert L. et al. Radiation therapy induces
macrophages to suppress T - cell responses against
pancreatic tumors in mice // Gastroen terology -2016. -
№ 150. – с. 1659
87. Patel S. A. et al. Combination cancer therapy
with immune checkpoint blockade: mechanisms and
strategies // Immunity -2018. -№ 48. – с. 417
88. Goldsmith K. et al. Infected cell protein
(ICP)47 enhances herpes simplex virus ne urovirulence
by blocking the CD8+ T cell response // J. Exp. Med. -
1998. -№ 187. – с. 341
89. Ribas A. et al. Oncolytic virotherapy
promotes intratumoral T cell infiltration and improves
anti -PD -1 immunotherapy // Cell -2018. -№ 174. – с.
1031
90. Ribas A. et al. SD -101 in combination with
pembrolizumab in advanced melanoma: results of a
phase Ib, multic enter study // Cancer Discov. -2018. -
№ 8. – с. 1250
91. Guiducci C. et al. Redirecting in vivo
elicited tumor infiltrating macrophages and dendritic
cells towards tumo r rejection // Cancer Res. -2005. -№
65. – с. 3437
92. Vicari A. P. et al. Reversal of tumor - induced
dendritic cell paralysis by CpG immunostimulatory
oligonucleotide and anti -interleukin 10 receptor
antibody // J. Exp. Med. -2002. -№ 196. – с. 541
93. Sagiv -Barf i I. et al. Eradication of
spontaneous malignancy by local immunotherapy //
Sci. Transl. Med . -2018. -№ 10. – с. eaan4488
94. Ishizuka J. J. et al. Loss of ADAR1 in
tumours overcomes resistance to immune checkpoint
blockade // Nature -2018. -№ 565. – с. 43
95. Wan g H. et al. cGAS is essential for the
antitumor effect of immune checkpoint blockade //
Proc . Natl Acad. Sci. USA -2017. -№ 114. – с. 1637
96. Morrison A. H. et al. Immunotherapy and
prevention of pancreatic cancer // Trends cancer -2018.
-№ 4. – с. 418
97. Byrne K. T. et al. CD40 stimulation obviates
innate sensors and drives T cell immunity in cancer / /
Cell Rep. -2016. -№ 15. – с. 2719
98. Ma D. Y. et al. The role of CD40 and
CD154/CD40L in dendritic cells // Semin. Immunol. -
2009. -№ 21. – с. 265
99. Roybal K. T. et al. Synthetic immunology:
hacking immune cells to expand their therapeutic
capabilities // Ann u. Rev. Immunol. -2017. -№ 35. – с.
229
100. Ljunggren H. G. et al. In search of the
«missing self»: MHC molecules and NK cell
recognition // Immunol. Today -1990. -№ 11. – с. 237
101. Andre P. et al. Anti - NKG2A mAb is a
checkpoint inhibitor that promotes anti - tum or
immunity by unleashing both T and NK cells // Cell -
2018. -№ 175. – с. 1731

БАЗОВЫЕ КРИТЕРИИ ПАТ ОМОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ДИА ГНОСТИКИ НОВООБРАЗОВ АНИЙ
МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Пищенко Елена Ефимовна,
ассистент*
Кокул Анна Сергеевна,
клинический ординатор*
Гарбуз Людмил а Ильинична,
к.б.н., доцент**
Вдовиченко Константин Константинович,
к.б.н., доцент**
*кафедра анатомии и общей патологии
**кафедра биологии и физиологии человека
медицинский факультет,
ПГУ им. Т. Г. Шевченко, г. Тирасполь, ул. Мира , 33, Приднестровье